蛋白胨细胞怎么冷冻保存呢?
蛋白胨细胞的冷冻保存一直是生物科技以及医疗行业的难题,如何克服冷冻过程中的种种弊端,科学合理的冷冻蛋白胨细胞一直是业内人士追求的课题,其实蛋白胨细胞的冷冻技术也并不复杂。
下面我就给大家讲解下:
1·程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至(-80℃以下)-120℃,再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。
配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,蛋白胨哪家好,加入培养基、XQ,逐滴加入二甲J亚砜(DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。
离心收集培养之细胞,动物蛋白胨,用加XQ的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1ml)计数细胞浓度及冻前存活率。
取与蛋白胨细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSO最后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ml,混合均匀,分装于已标示完全之冷冻保存管中,1~2mlial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
2·传统方法: 冷存管置于4℃10分钟--->-20℃30分钟--->-80℃16~18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成蛋白胨细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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